產品簡介

Transporter 5轉染試劑是一種非GMP等級的即用型線性聚乙烯亞胺（PEI轉染試劑）溶液，由PEI MAX配置而成，采用0.1um PES無菌過濾器，完全消除支原體污染風險。Transporter 5將DNA縮聚成帶正電荷的復合物，這些復合物很容易通過內吞作用進入細胞，并且Transporter 5-DNA 復合物能很好地抵御溶酶體的降解作用，有效提高轉染效率。適用于工藝開發、臨床前和早期臨床研究，可無縫過渡到MAXgene GMP用于商業化生產。

Transporter 5轉染試劑能效率更高地將DNA轉染入HEK-293、CHO、COS、HELA、昆蟲（SF9、SF21） 等真核細胞系，可作用于大到135,000個核苷酸的質粒，所以較大的質粒也可以成功地轉染。 

Transporter 5可(ke)節省試劑(ji)準(zhun)備時間，加快(kuai)項目進度。經過嚴格的(de)性能檢測，確保品質，在新(xin)藥研發過程中(zhong)是一款(kuan)快(kuai)速、重復性好、可(ke)用于(yu)批量(liang)產(chan)的(de)轉(zhuan)染試劑(ji)。

產品特點

1、非GMP，研究級PEI轉染試(shi)劑溶液

2、高轉(zhuan)染效率(lv)

3、無縫過渡到MAXgene GMP

4、易放大，可(ke)預測(ce)產量

5、用(yong)于工藝開發，臨(lin)床(chuang)前和早期臨(lin)床(chuang)研究(jiu)

轉染示意圖

含(han)血(xue)清培養的(de)貼壁細胞轉染(ran)流程

1. 準備工作

? 轉染前 18~24 小時細胞鋪板。

? 在培養基中加入合適數量的細胞，以確保在轉染前形成 60~80%匯合度的單細胞層，此為最理想的細胞轉染密度。

各規格(ge)培養容器中(zhong)貼壁細(xi)胞鋪板密度參(can)考(kao)表

2. 轉染步驟（以 6 孔板單孔舉例）

? 轉染前 1~2 小時，將需要轉染的孔中的培養基替換成 3 mL 新鮮的含有2%低血清或無血清的培養基。（高濃度血清抑制 Transporter 5 的性能，大多數情況下，較低的血清含量(≤ 5%)或無血清將獲得較高的轉染效率）。

? 準備Transporter 5-DNA 轉染混合物（以下操作順序尤為關鍵）。

1) 在含有300uL（3mL的10%）稀釋液的聚丙烯 EP 管中加入 2ug質粒 DNA；

2) 輕輕地混勻/振蕩溶液；

3) 在 DNA 溶液中加入 2~8 uL Transporter 5 轉染試劑（Transporter 5-DNA 的比例建議在 1~4：1 之間優化，首次推薦使用 2：1 或 3：1）；

4) 渦旋振蕩 5 秒鐘；

5) 將管子靜置于超凈工作臺 10~15 分鐘，使 Transporter 5-DNA 復合物形成（建議共孵育時間不超過 20 分鐘）；

6) 用移液器輕輕上下吹打混合液 3 次

? 邊晃動細胞培養板，邊將 Transporter 5-DNA 混合液加入更換了培養基的轉染孔中，確保 Transporter 5-DNA 復合物均勻分布，防止局部濃度過高。

3. 孵育培養

  ? 將細胞培養板放入培養箱培養 18~24小時后，更換含有血清的正常培養基；

  ? 通常，在轉染后 36-48 小時可檢測到重組蛋白表達或包裝的病毒顆粒，轉染后 72-96 小時可觀察到最大產量。

經過馴化(hua)的(de)無血清培養懸(xuan)浮(fu)細胞(bao)轉染流(liu)程

1.準備工作

 轉染前 2~3 小時，種植細胞密度為 1X10⁶ /mL 于培養容器中。

2. 轉染步驟（以 250 mL 搖(yao)瓶為例，轉染前種植(zhi)細胞總體積(ji)為 25 mL，最終總培養(yang)體積(ji)為 50 mL）

準備 Transporter 5-DNA 轉染混合物（以下操作順序尤為關鍵）。

1)在含有 2.5 mL（25mL 的 10%）稀釋液的聚丙烯 EP 管中加入 50ug 質粒 DNA（質粒用量建議在 1~2ug/106 細胞之間優化，此處使用 2ug/10⁶ 細胞）

2) 輕輕地混(hun)勻/振蕩溶液(ye)

3) 在 DNA 溶液中加入 50~200uL Transporter 5 轉染試劑（Transporter 5/DNA 的比例建議在 1~4：1 之間優化，首次推薦使用 2：1 或 3：1）

4) 渦(wo)旋振蕩 5 秒(miao)鐘

5) 將管子靜置于超凈工作臺 10~15 分鐘，使 Transporter 5-DNA 復合物形成（建議共孵育時間不超過 20 分鐘）

6) 用移液器輕輕上下吹打(da)混(hun)合液 3 次(ci)

注：邊晃動搖瓶，邊將 Transporter 5-DNA 混合液加入更換了培養基的轉染孔中，確保Transporter 5-DNA 復合物均勻分布，防止局部濃度過高。

3. 孵育培養

將細胞培養瓶放入培養箱，搖瓶培養 2~3 小時后，加入 25 mL 新鮮培養基，繼續培養。

通常，在轉染后 36-48 小時可檢測到重組蛋白表達或包裝的病毒顆粒。轉染后 72-96 小時可觀察到最大產量。