一、前言

在前兩篇文章《干細胞研(yan)究與應用的關鍵要素》和《521 CTG 細胞培(pei)養優選方案》中，我(wo)們介紹了全長(chang)的(de)Laminin 521在原(yuan)始細(xi)胞生(sheng)態位的(de)重要(yao)組成作用、實(shi)際(ji)出色的(de)培(pei)養(yang)效果及良(liang)好的(de)產品資質。本(ben)文，我(wo)們就BioLaminin 521在實(shi)際(ji)應用場景中可(ke)兼容的(de)培(pei)養(yang)容器類型展(zhan)開敘述，以更好的(de)幫助(zhu)科研人員在干(gan)細(xi)胞培(pei)養(yang)時找(zhao)到適合(he)研究目(mu)的(de)包被底物。

在(zai)生(sheng)命(ming)科學(xue)研究(jiu)與細(xi)胞培養制造領域(yu)，選(xuan)擇合適的細(xi)胞培養底(di)物(wu)尤為重(zhong)要。BioLamina公司的Biolaminin系列產品，為各種細(xi)胞培養場(chang)景提供了(le)多樣化、可信賴的解決(jue)方(fang)案。

二、一種細胞培養底物適應多種細胞培養形式

?  有眾(zhong)多科學研究驗證，Biolaminin有助(zhu)于穩定的干細胞培養過程

?  研究級laminin和細胞治療(liao)級（CTG）laminin，能(neng)滿足科學家不同階段(duan)的需(xu)求(qiu)

?  細胞(bao)治(zhi)療級(ji)CTG521成分明確(que)，不含(han)動物源成分，符(fu)合(he)臨床(chuang)階段各項監(jian)管要(yao)求

?  全長Biolaminin對細胞培養的有益作用，可應用于多種培養形式，從微孔板到大規模擴增的培養方式，適用于玻璃、金屬等多種材料，在成像系統及細胞模型構建等環節均能發揮作用

三、BioLamina產品在研究和生產的實際應用

1、細胞微孔板(Microtiter plate)

Biolaminin 521可(ke)為(wei)人多(duo)能(neng)干細胞（hPSC）實現可(ke)靠的(de)自動(dong)化(hua)成像工作流程（例如基(ji)(ji)因(yin)編(bian)輯(ji)場景）。使用高內(nei)涵圖像分析(xi)系統評估(gu)，在(zai)96孔板中，與基(ji)(ji)質膠（Matrigel）、玻連蛋(dan)白（vitronectin）和纖連蛋(dan)白（fibronectin）相比，在(zai)LN521上進行基(ji)(ji)因(yin)編(bian)輯(ji)時人類誘(you)導(dao)多(duo)能(neng)干細胞（hiPSC）具有良好匯合度。

另外，研究(jiu)96孔或(huo)384孔板中培養的(de)(de)LN521上的(de)(de)人(ren)類多(duo)能干(gan)細(xi)胞(bao)克隆，產生的(de)(de)克隆中近100%的(de)(de)細(xi)胞(bao)保留(liu)了多(duo)能性(xing)標(biao)記物(wu)，并(bing)且具有經典的(de)(de)集(ji)落形態（另見原文文獻，可聯(lian)系我們獲取(qu)）。

LN521支持iPSC良好匯合度

2、細胞培養瓶（flask）

Biolaminin 521可(ke)支持誘導多能干細(xi)胞（iPSC）擴(kuo)增和后續分化，兼容無動物源性(xing)且成分確定的培(pei)養方案。

A）對重編程后的iPSC進行(xing)多(duo)能性標記(ji)物（OCT4、NANOG、SSEA-4）的表達進行(xing)染色（比例尺100μm）。

B）通過擬(ni)胚體（EB）形成實(shi)驗所證實(shi)的多(duo)能性，在第21天(tian)對胚層標記物進行逆轉錄聚合酶(mei)鏈式反(fan)應(ying)（RT-PCR）。

LN521支(zhi)持flask中培(pei)養hiPSCs的多能性和(he)EBs三系分化(hua)能力

3、中空纖(xian)維（Hollow fiber）

Biolamin 521是(shi)用于大規模擴增的優選底物(wu)。在配備有包被(bei)了LN521的多孔中(zhong)空纖維(wei)（由(you)聚(ju)芳醚砜(feng)（PAES）、聚(ju)乙烯吡(bi)咯烷酮(tong)（PVP）和聚(ju)酰(xian)胺（PA）聚(ju)合(he)物(wu)組成）的Quantum擴增系統中(zhong)，進行(xing)誘導多能干(gan)細胞（iPSC）的擴增，與Vitronectin相(xiang)比(bi)，實現了以下(xia)效果：A）細胞數(shu)量增加；B）群體倍增增加。

并且(qie)，維持了(le)多能(neng)性、核型(xing)，以及向三個胚(pei)層分化的能(neng)力（另見(jian)原文文獻，可聯系(xi)我們獲取）。

LN521較Vitronectin更支持中空纖維(wei)柱中iPSC的擴(kuo)增

4、微載體（Microcarrier）

Biolaminin 521對(dui)微(wei)載體（MC）進行(xing)包被，能在(zai)攪拌條件下有效地支(zhi)持人類胚胎(tai)干細胞（hESC）的(de)附著和(he)鋪(pu)展，且(qie)無需額外的(de)正電荷（聚賴(lai)氨酸（PLL）或陽(yang)離子修飾聚苯乙烯（Plastic Plus））。

數據(ju)顯示(shi)，無論(lun)是否有額(e)(e)外的(de)(de)正電(dian)荷，經Biolaminin 521包被的(de)(de)微(wei)載(zai)體，其鋪展(zhan)效率都很高(gao)，圓(yuan)形、部(bu)分鋪展(zhan)和(he)完全鋪展(zhan)的(de)(de)細胞占比在83%至88%之(zhi)間，而相比之(zhi)下，沒(mei)有額(e)(e)外電(dian)荷時，LN111（包被的(de)(de)微(wei)載(zai)體）的(de)(de)這一比例(li)僅(jin)為13%至16% 。

PS = 無(wu)孔聚苯(ben)乙(yi)烯微載體(ti)(ti)；Plastic = 多孔交聯聚苯(ben)乙(yi)烯微載體(ti)(ti)。

LN521包被(bei)微載(zai)體支持攪(jiao)拌條(tiao)件(jian)下3D培養iPSC

四、總結：為何使用BioLaminin

?  高生物相關性支持細胞真實活動：Biolaminin讓細胞在培養中更接近體內真實狀態。

?  高增殖性并保持細胞完整性：支持應用低傳代細胞系產生具有臨床意義數量的細胞。

?  高批次間一致性利于標準化實驗：多能性基因表達模式統一，減少實驗中的差異。

?  高分化效率：促進細胞分化、成熟，幫助形成肝、心肌及神經元等特殊細胞類型。

?  成分明確適用于無血清培養體系：為不含動物源成分的重組蛋白。

?  資質良好成分具完整可追溯性：細胞治療級CTG521可提供動物源聲明、分析證書和安全數據表等質量文件，滿足IND項目臨床階段監管需求。

五、展望

BioLamina公司的(de)層粘連蛋(dan)白產品憑借其生物(wu)學相關性(xing)、高(gao)擴增率、批(pi)次穩定性(xing)、促進細胞分化、無動(dong)物(wu)源成分以及適用(yong)(yong)性(xing)廣等諸多優勢(shi)，為(wei)生命科學研(yan)究和(he)(he)細胞治療領域(yu)帶來(lai)了(le)新的(de)突破和(he)(he)發展機遇。隨著(zhu)科技的(de)不(bu)斷進步和(he)(he)對細胞培(pei)養技術要求(qiu)的(de)日益(yi)提高(gao)，其有望在(zai)更多領域(yu)發揮(hui)重要作用(yong)(yong)，推(tui)動(dong)整(zheng)個生命科學產業的(de)發展，為(wei)人類健(jian)康(kang)事業做(zuo)出更大(da)的(de)貢獻。

六、參考資料

BioLamina products in research and manufacturing

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讓我們共同(tong)關注細(xi)胞治療領(ling)域的發(fa)展，期(qi)待更(geng)多突破！