一、前言

在前兩篇文章《干細胞研究與應用(yong)的關鍵(jian)要素》和《521 CTG 細胞培養優選方案(an)》中(zhong)，我(wo)們介紹(shao)了(le)全長的(de)(de)Laminin 521在原始細胞生(sheng)態位(wei)的(de)(de)重要(yao)組成作(zuo)用、實(shi)際出色(se)的(de)(de)培(pei)(pei)養效果及(ji)良(liang)好的(de)(de)產(chan)品資質。本文，我(wo)們就BioLaminin 521在實(shi)際應(ying)用場景中(zhong)可兼容(rong)的(de)(de)培(pei)(pei)養容(rong)器(qi)類型展開敘述(shu)，以更好的(de)(de)幫助科研人員在干細胞培(pei)(pei)養時找到(dao)適合研究目的(de)(de)包(bao)被底物。

在生命(ming)科(ke)學研究與細胞(bao)培(pei)(pei)養制造領域(yu)，選擇合適的(de)細胞(bao)培(pei)(pei)養底物尤為重要。BioLamina公司的(de)Biolaminin系列產品，為各種細胞(bao)培(pei)(pei)養場景(jing)提供(gong)了多樣化、可信賴的(de)解決方案。

二、一種細胞培養底物適應多種細胞培養形式

?  有(you)眾(zhong)多科學研究(jiu)驗證，Biolaminin有(you)助于穩(wen)定的(de)干細胞培養過程

?  研究級(ji)laminin和(he)細胞(bao)治療(liao)級(ji)（CTG）laminin，能滿(man)足科(ke)學家(jia)不同階(jie)段的需(xu)求

?  細胞治療級CTG521成分(fen)明確，不含(han)動物源成分(fen)，符合(he)臨床階(jie)段各(ge)項監管要求

?  全長Biolaminin對細胞培養的有益作用，可應用于多種培養形式，從微孔板到大規模擴增的培養方式，適用于玻璃、金屬等多種材料，在成像系統及細胞模型構建等環節均能發揮作用

三、BioLamina產品在研究和生產的實際應用

1、細胞微孔板(ban)(Microtiter plate)

Biolaminin 521可(ke)為人多(duo)能干細胞(bao)（hPSC）實現(xian)可(ke)靠的自動化成像工作流(liu)程（例(li)如基(ji)因編輯場景）。使用高內涵圖(tu)像分析系統評(ping)估，在(zai)96孔板(ban)中，與基(ji)質膠(jiao)（Matrigel）、玻連蛋(dan)白（vitronectin）和(he)纖連蛋(dan)白（fibronectin）相比，在(zai)LN521上(shang)進行基(ji)因編輯時人類誘導多(duo)能干細胞(bao)（hiPSC）具有(you)良(liang)好匯(hui)合(he)度(du)。

另(ling)外，研究96孔或384孔板中(zhong)(zhong)培養的LN521上的人類(lei)多能(neng)干細胞克隆，產生(sheng)的克隆中(zhong)(zhong)近(jin)100%的細胞保(bao)留了多能(neng)性標記物，并(bing)且具有經典(dian)的集落形態（另(ling)見原文(wen)文(wen)獻，可(ke)聯系(xi)我(wo)們獲取）。

LN521支持iPSC良好匯合度

2、細胞培養(yang)瓶（flask）

Biolaminin 521可(ke)支持誘導多能干細胞（iPSC）擴增和后續分化，兼容無動物源(yuan)性且成(cheng)分確定的培養(yang)方案。

A）對重編程后的iPSC進行多(duo)能性標記物(wu)（OCT4、NANOG、SSEA-4）的表達進行染(ran)色（比例(li)尺100μm）。

B）通過擬胚體（EB）形(xing)成(cheng)實驗(yan)所證實的多能(neng)性，在第(di)21天對(dui)胚層標記物(wu)進行(xing)逆轉(zhuan)錄聚合酶鏈(lian)式反(fan)應（RT-PCR）。

LN521支持flask中培養hiPSCs的多能(neng)性和EBs三系分化(hua)能(neng)力(li)

3、中(zhong)空纖維（Hollow fiber）

Biolamin 521是用于大規(gui)模擴(kuo)(kuo)(kuo)增(zeng)(zeng)的(de)(de)優(you)選底物。在(zai)配備(bei)有包被了(le)LN521的(de)(de)多孔(kong)中空(kong)纖(xian)維（由聚(ju)芳(fang)醚(mi)砜（PAES）、聚(ju)乙烯吡咯烷(wan)酮(tong)（PVP）和聚(ju)酰胺（PA）聚(ju)合物組成(cheng)）的(de)(de)Quantum擴(kuo)(kuo)(kuo)增(zeng)(zeng)系統中，進行誘導多能干細胞（iPSC）的(de)(de)擴(kuo)(kuo)(kuo)增(zeng)(zeng)，與Vitronectin相比(bi)，實現(xian)了(le)以下效果：A）細胞數量增(zeng)(zeng)加；B）群體倍增(zeng)(zeng)增(zeng)(zeng)加。

并且(qie)，維持了多能性、核型，以及向三(san)個(ge)胚層分化的能力（另見原文(wen)文(wen)獻，可聯系我們獲(huo)取）。

LN521較Vitronectin更支(zhi)持中空纖維柱中iPSC的擴增

4、微載體（Microcarrier）

Biolaminin 521對微載體（MC）進(jin)行包被，能在(zai)攪(jiao)拌條件下有效地支持人類(lei)胚(pei)胎干細胞(bao)（hESC）的附著(zhu)和鋪(pu)展，且無需額外的正電荷（聚賴氨酸(suan)（PLL）或陽(yang)離(li)子修飾聚苯乙烯（Plastic Plus））。

數據顯示，無論是否有(you)額外(wai)的(de)(de)正電(dian)荷，經Biolaminin 521包(bao)被的(de)(de)微(wei)載體，其(qi)鋪展效率都很高，圓(yuan)形、部(bu)分(fen)鋪展和完全鋪展的(de)(de)細胞占比(bi)在83%至88%之(zhi)間(jian)，而相比(bi)之(zhi)下(xia)，沒有(you)額外(wai)電(dian)荷時，LN111（包(bao)被的(de)(de)微(wei)載體）的(de)(de)這一比(bi)例(li)僅為13%至16% 。

PS = 無孔(kong)聚苯乙烯微載體(ti)；Plastic = 多孔(kong)交聯聚苯乙烯微載體(ti)。

LN521包被微載體支持(chi)攪拌條件(jian)下3D培養iPSC

四、總結：為何使用BioLaminin

?  高生物相關性支持細胞真實活動：Biolaminin讓細胞在培養中更接近體內真實狀態。

?  高增殖性并保持細胞完整性：支持應用低傳代細胞系產生具有臨床意義數量的細胞。

?  高批次間一致性利于標準化實驗：多能性基因表達模式統一，減少實驗中的差異。

?  高分化效率：促進細胞分化、成熟，幫助形成肝、心肌及神經元等特殊細胞類型。

?  成分明確適用于無血清培養體系：為不含動物源成分的重組蛋白。

?  資質良好成分具完整可追溯性：細胞治療級CTG521可提供動物源聲明、分析證書和安全數據表等質量文件，滿足IND項目臨床階段監管需求。

五、展望

BioLamina公司的(de)(de)(de)(de)層(ceng)粘連(lian)蛋白產(chan)品憑借其生(sheng)物學(xue)相關性、高(gao)擴(kuo)增率、批次穩(wen)定性、促進細(xi)胞(bao)分化(hua)、無動物源(yuan)成分以及適用性廣等(deng)諸多優勢，為生(sheng)命科學(xue)研究和細(xi)胞(bao)治療領域帶來了(le)新(xin)的(de)(de)(de)(de)突破和發展機遇。隨著科技(ji)(ji)的(de)(de)(de)(de)不(bu)斷進步(bu)和對細(xi)胞(bao)培養技(ji)(ji)術要求的(de)(de)(de)(de)日益提高(gao)，其有望在(zai)更多領域發揮重要作用，推動整個(ge)生(sheng)命科學(xue)產(chan)業(ye)的(de)(de)(de)(de)發展，為人類健康事(shi)業(ye)做出更大(da)的(de)(de)(de)(de)貢獻。

六、參考資料

BioLamina products in research and manufacturing

(了解更多詳細信息及獲取原文(wen)件，請(qing)聯(lian)系上海曼(man)博生(sheng)物！)

讓我們共同關注細胞(bao)治療領(ling)域(yu)的發展(zhan)，期待更多突破！