產品簡介

LentiBOOST是(shi)(shi)一(yi)種效率高、無(wu)細(xi)(xi)胞(bao)毒性的(de)(de)LV轉(zhuan)(zhuan)(zhuan)導增(zeng)強劑(ji)，用(yong)于臨床前和臨床的(de)(de)LV載體轉(zhuan)(zhuan)(zhuan)導。它是(shi)(shi)一(yi)種非離子型、非受體依賴(lai)性的(de)(de)表面活性劑(ji)，通過降(jiang)低細(xi)(xi)胞(bao)膜(mo)(mo)粘(zhan)稠度(du)、提高脂質交換(huan)和跨(kua)膜(mo)(mo)轉(zhuan)(zhuan)(zhuan)運(yun)，促進LV與(yu)細(xi)(xi)胞(bao)膜(mo)(mo)的(de)(de)融合，提高細(xi)(xi)胞(bao)轉(zhuan)(zhuan)(zhuan)導效率。

目前LentiBOOST LV轉導增強劑在美國(guo)和歐(ou)洲(zhou)已有(you)30多(duo)個藥(yao)物(wu)phase III/II/I臨床實驗中，并有(you)相(xiang)關藥(yao)物(wu)已上市銷售(shou)。

產品特點

  1.增強(qiang)LV轉導效率，可高(gao)達90%—提高(gao)治療蛋白表達量，有利(li)于取得(de)臨床試驗成(cheng)功

  2.減少(shao)(shao)MOI低至2倍，從而降(jiang)低COGS（Cost of goods sold）——減少(shao)(shao)Lentivirus的用量和物料成本

  3.控制單個(ge)細胞中的LV載體拷貝(bei)數（VCN，Virus Copy Number）——符合(he)FDA/EMA對ATMPs(Advanced Therapy Medicinal Products)產品的安全標準

  4.易于(yu)使用——無需改變現有轉(zhuan)導(dao)流程，兼(jian)容已經(jing)開發流程

  5.提供研(yan)究級(ji)(ji)和GMP級(ji)(ji)——GMP級(ji)(ji)具有臨床試(shi)驗的所(suo)有必備文件

  6.30多種應用(yong)LentiBOOST的藥物(wu)已在美國和(he)歐洲進入臨床試驗（Phase III和(he)Phase I/II）階(jie)段——加(jia)速了IND文件歸(gui)檔

注：研究級（phama grade）僅適用于早期研發和(he)工藝優化(hua)階段，不建議臨床階段使(shi)用。

另有GMP garde支持臨床申報及(ji)商業化生產，貨號SB-A-LF-900-01。

作用原理

應用領域

LentiBOOST可應用于多種(zhong)臨床(chuang)(chuang)相關細(xi)胞類(lei)型(xing)，包括CD34+造血干(gan)細(xi)胞（HSCs），間充質(zhi)干(gan)細(xi)胞（MSCs），神經干(gan)細(xi)胞，原代T細(xi)胞，NK細(xi)胞和(he)成纖維細(xi)胞等(deng)，對(dui)于難轉導(dao)的小鼠T細(xi)胞亦有(you)效(xiao)。已成為改進體(ti)外基因治(zhi)療和(he)CAR-T細(xi)胞治(zhi)療的臨床(chuang)(chuang)轉導(dao)方案的理(li)想選擇。

客戶體驗

·  LentiBOOST提高LV轉導效率

·  LentiBOOST無細胞毒性，不影響細胞增殖和分化

·  LentiBOOST控制單個細胞中載體拷貝數，符合EMA/FDA對基因改造細胞治療的安全原則

第1天: 種細胞

參(can)考表格的(de)細(xi)胞(bao)密度進行種板(ban)(ban)（注意：如果細(xi)胞(bao)維持(chi)在(zai)某種選擇壓力下，種板(ban)(ban)時需要(yao)去除(chu)用于篩選的(de)抗生素，直至維持(chi)到第3天 ）

第2天: 病毒轉導

總原則：對于第(di)一次實驗，建議使用2-30之間的(de)MOIs進行病(bing)毒(du)(du)轉導（如下實驗步(bu)驟(zou)以MOI 10舉例），并將LentiBOOST-P以1：100的(de)標準濃度(du)添加(jia)到總體積（培(pei)養(yang)基(ji)+病(bing)毒(du)(du)）。

在第二(er)次實驗中(zhong)，建議在1:20-1:1000范(fan)圍內(nei)滴定LentiBOOST-P用量，以(yi)確定最小活性(xing)濃度。（各組分用量僅供參考，實際最佳轉導條(tiao)件以(yi)實驗室優化結果(guo)為準(zhun)）

1.4°C復蘇慢病毒

2.在細胞中(zhong)直(zhi)接加(jia)入計算(suan)好的LentiBOOST-P體積量(liang)，輕(qing)輕(qing)混(hun)勻(yun)

3.按下表計算(suan)所需慢病(bing)毒顆粒用量，并(bing)加(jia)入細(xi)胞培(pei)養(yang)基(ji)中，輕(qing)輕(qing)混(hun)勻

4.Spinoculate（可(ke)選(xuan)）：室溫800g離(li)心培(pei)(pei)養板90分鐘（注意: Spinoculation步驟被發現可(ke)對大多數(shu)細(xi)胞增加轉導效率(lv)。必(bi)須使用細(xi)胞培(pei)(pei)養板進(jin)行離(li)心，以減少剪切(qie)力(li)）

5.正常(chang)培(pei)養(yang)條件過夜培(pei)養(yang)細胞

第3天: 更換培養基

移除含有病(bing)毒顆粒的培養基上清(qing)，更換成合適體積(ji)的正常(chang)培養基

第4天 : 維持培養

如果細胞匯合度較高，可在第四天稀釋分板培(pei)養，后續按(an)照常規流(liu)程進行培(pei)養基更(geng)換和(he)細胞傳代

第5天: 篩選穩定細胞系（可選）

利用LV載體上的抗性(xing)篩(shai)選(xuan)標記可篩(shai)選(xuan)出穩(wen)定細(xi)胞(bao)系(xi)，事(shi)先需要(yao)進行(xing)殺傷(shang)曲線滴定合適的抗生(sheng)素篩(shai)選(xuan)濃度。（備注: 轉導(dao)過程(cheng)中請做好非(fei)轉導(dao)陰性(xing)對照）

1.去除細胞中的(de)培養基(ji)

2.加入含有一定濃度篩(shai)選抗生素的培養基

3.定期更(geng)換含有抗生素的培養基并持續培養細胞