在外源(yuan)微(wei)生(sheng)物、腫瘤蛋白等(deng)抗原(yuan)的刺激下，機體(ti)(ti)調(diao)(diao)動T細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)等(deng)免疫(yi)(yi)(yi)細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)產生(sheng)免疫(yi)(yi)(yi)反(fan)應(ying)以維持機體(ti)(ti)的穩態(tai)。其(qi)作用機制為，來自病(bing)原(yuan)微(wei)生(sheng)物或者腫瘤抗原(yuan)被(bei)加工成(cheng)多(duo)肽(tai)，這些多(duo)肽(tai)由抗原(yuan)提呈細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)APC識(shi)別(bie)，形成(cheng)pMHC后呈遞給T細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)。T細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)的TCR分別(bie)識(shi)別(bie)pMHC抗原(yuan)肽(tai)以及MHC分子（MHC I和MHC II，CD8+T細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)識(shi)別(bie)MHC I，CD4+T細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)識(shi)別(bie)MHC II），從而調(diao)(diao)動不同的免疫(yi)(yi)(yi)T細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)進(jin)行(xing)免疫(yi)(yi)(yi)應(ying)答。

Dextramer技術通過構建抗(kang)原肽MHC的pMHC復合物(wu)，幫助全面了解抗(kang)原特(te)異性(xing)細(xi)胞(bao)免疫(yi)反(fan)應，發(fa)現(xian)、檢測(ce)表征抗(kang)原特(te)異性(xing)T細(xi)胞(bao)，可應用于(yu)流(liu)式(shi)細(xi)胞(bao)術、單細(xi)胞(bao)多組(zu)學、T細(xi)胞(bao)治(zhi)療(liao)等(deng)研究領域(yu)。

Immudex開(kai)發的(de)Dextramer技術(shu)基于一條右(you)旋糖酐(gan)骨(gu)架(jia)（Dextramer），在骨(gu)架(jia)上附著10-20個MHC-抗原(yuan)肽復合物（pMHC）或(huo)其他的(de)免疫受體(ti)特異性分子(zi)，從而構(gou)建出高親(qin)和(he)力的(de)檢(jian)測分子(zi)，包(bao)括(kuo)低親(qin)和(he)力T細(xi)胞(bao)。此(ci)外，每條Dextramer分子(zi)上攜帶了熒光素標(biao)簽或(huo)者DNA條形碼信(xin)息，從而開(kai)展流氏細(xi)胞(bao)術(shu)或(huo)單細(xi)胞(bao)多組(zu)學研究。

MHC Dextramer 特點

01   Dextran骨架：穩定蛋白(bai)質

02   pMHC復合物：增加靈敏性

03   高熒(ying)光素：增強(qiang)熒(ying)光分辨率(lv)

一、Immudex MHC Dextramer具有高親和力

不(bu)同類(lei)型的疾(ji)病(bing)中，TCRs與其肽/MHC結合的親(qin)(qin)和(he)力(li)(li)(li)不(bu)同。在(zai)疾(ji)病(bing)中，自身免(mian)疫和(he)癌(ai)癥TCRs的親(qin)(qin)和(he)力(li)(li)(li)較低(di)，介(jie)于20-500 μM之(zhi)間，而抗(kang)病(bing)原體TCRs通(tong)常具(ju)有較高的親(qin)(qin)和(he)力(li)(li)(li)，大(da)約在(zai)0.1-10 μM左(zuo)右。為了驗證在(zai)不(bu)同疾(ji)病(bing)環境中Dextramer和(he)Tetramer對(dui)(dui)于高低(di)TCR親(qin)(qin)和(he)力(li)(li)(li)表現，對(dui)(dui)Dextramer和(he)Tetramer進(jin)行高親(qin)(qin)和(he)力(li)(li)(li)或低(di)親(qin)(qin)和(he)力(li)(li)(li)TCR檢測研究。

結果1：對于低親和力TCR，Dextramer不僅可以檢測到Tetramer檢測到的抗原特異性T細胞，還可以檢測到Tetramer無法檢測到的抗原特異性T細胞。結果表明，對于低親和力的T細胞，Dextramer具有的新靈敏度水平能夠發現Tetramer無法識別的抗原特異性群體。

結果2：對于高親和力TCR，Dextramer和Tetramer兩者都能夠靈敏的檢測抗原特異性群體，但流氏分析結果顯示，Dextramer染色具有出更好的熒光分辨率。

綜合以上結果顯(xian)示(shi)，Dextramer試劑在檢測T細胞的TCR親和力方面顯(xian)示(shi)出較高的靈敏度。

圖：MHC Dextramer高親和力性能展示

二、Immudex MHC Dextramer具有高分辨率

為了驗證MHC Dextramer的(de)(de)分辨(bian)(bian)率，分別(bie)對(dui)比了Dextramer和(he)Tetramer結合HLA-A*0201分子后的(de)(de)PE熒光檢測結果。結果顯示，MHC Dextramer的(de)(de)分辨(bian)(bian)率達(da)到(dao)(dao)(dao)131，中(zhong)位(wei)熒光密度達(da)到(dao)(dao)(dao)301，而MHC Dextramer的(de)(de)分辨(bian)(bian)率達(da)到(dao)(dao)(dao)373，中(zhong)位(wei)熒光密度達(da)到(dao)(dao)(dao)1104。研(yan)究結果顯示，MHC Dextramer具有更高的(de)(de)分子檢測靈敏性。

三、Immudex MHC Dextramer具有高度批間一致性

為(wei)了驗證MHC Dextramer的(de)(de)實驗穩定(ding)性(xing)和重復性(xing)，比較針(zhen)對EBV、CMV（兩(liang)種不同(tong)(tong)的(de)(de)肽）和流感病毒(du)三種不同(tong)(tong)批(pi)次(ci)的(de)(de)MHC I Dextramer試劑，結果顯示，無論(lun)何(he)種病原(yuan)肽，不同(tong)(tong)批(pi)次(ci)的(de)(de)MHC I Dextramer識別(bie)的(de)(de)抗原(yuan)特異性(xing)CD8+ T細胞具(ju)有一致性(xing)。這表明Immudex MHC Dextramer具(ju)有高(gao)度的(de)(de)批(pi)間一致性(xing)。

總之，Dextramer試劑批次效應小，在檢測T細(xi)胞的TCR親和力方面顯(xian)示出較高的靈敏度，加上其具有(you)(you)的多(duo)個熒(ying)光基(ji)團(tuan)，因此具有(you)(you)更(geng)好的熒(ying)光分(fen)辨率，是特異免疫細(xi)胞檢測分(fen)析(xi)的優勢產(chan)品。

Immudex簡介

Immudex成立于2009年，總部位于丹麥哥本哈根，專注于為癌癥免疫治療、移植、傳染病和自身免疫領域的免疫監測提供解決方案。Immudex借助專有的Dextramer、dCODE Dextramer 技術，開發銷售研究試劑和檢測解決方案，包括GMP級別產品。Immudex產品按照 ISO 13485 和 21 CFR 820 定義的醫療器械質量體系要求制造，每種試劑和組合都具有高親和力、強大的檢測和靈活的實用性。Immudex 還在全球范圍內提供MHC多聚體和Elispot Panel服務，可以應用于流式細胞術、原味染色、NGS以及單細胞多組學研究領域。

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